Materia de estudio
Resumen del tema con citas literales de la normativa oficial. Lee los apuntes y luego pon a prueba lo que has aprendido en el test.
Este tema es transversal en la oposición TCAE: aparece en preguntas sobre técnica aséptica, seguridad del paciente y trabajo en equipo con el personal de enfermería. Dominar la recogida, conservación y transporte de muestras biológicas es imprescindible porque los errores en la fase preanalítica son la principal causa de resultados erróneos en el laboratorio.
Marco normativo
Las fuentes que regulan este tema son de naturaleza diversa:
- Norma UNE-EN ISO 6710: especificaciones técnicas para recipientes de un solo uso destinados a la toma de muestras de sangre venosa.
- Manual de recogida de muestras biológicas – SEIMC: referencia técnica de consenso nacional para microbiología clínica.
- Recomendaciones SEIMC: Hemocultivos (Procedimientos en Microbiología Clínica): protocolo específico para la extracción de hemocultivos.
- Recomendaciones SEQCML: fase preanalítica de gasometrías arteriales.
- Protocolo de recogida de muestras respiratorias – SEIMC / CNM-ISCIII: procedimiento para muestras del tracto respiratorio.
- Programa de cribado de cáncer colorrectal del SNS (Estrategia Nacional contra el Cáncer): regula la recogida de sangre oculta en heces.
- Real Decreto 65/2006, de 30 de enero: transporte de mercancías peligrosas, Clase 6.2 (sustancias infecciosas).
- Ley de Enjuiciamiento Criminal: cadena de custodia cuando la muestra tiene valor probatorio judicial.
Estructura del tema
El proceso de manejo de muestras biológicas se divide en tres fases:
- Recogida (fase preanalítica inicial)
- Conservación (fase preanalítica intermedia)
- Transporte (fase preanalítica final)
La fase preanalítica en su conjunto es la que concentra el mayor porcentaje de errores en el laboratorio clínico. El TCAE interviene principalmente en esta fase.
Conceptos clave
Identificación de la muestra
La identificación correcta es el primer paso y el más crítico. Según el Manual SEIMC, toda muestra debe ir acompañada de:
- Nombre completo del paciente y fecha de nacimiento (o número de historia clínica)
- Tipo de muestra y localización anatómica si procede
- Fecha y hora de recogida
- Nombre del profesional que realiza la extracción
- Prueba solicitada
Un error de identificación invalida la muestra. La etiqueta se coloca en el tubo, nunca solo en el tapón ni únicamente en el volante.
Tubos de extracción de sangre venosa (Norma UNE-EN ISO 6710)
La norma UNE-EN ISO 6710 establece los requisitos para los recipientes de un solo uso para toma de muestras de sangre venosa. Los tubos se identifican por el color del tapón, que indica el aditivo que contienen:
- Tapón rojo / sin aditivo: suero. Para bioquímica y serología.
- Tapón lila / EDTA: anticoagulante. Para hematología (hemograma).
- Tapón azul / citrato sódico: coagulación. Debe llenarse exactamente hasta la marca (relación 9:1 sangre/citrato).
- Tapón verde / heparina de litio o sodio: plasma. Bioquímica urgente.
- Tapón gris / fluoruro sódico + oxalato: glucosa y lactato.
- Tapón negro / citrato sódico al 3,2%: VSG (velocidad de sedimentación globular).
Orden de extracción (según SEIMC): hemocultivos → tubo sin aditivo (rojo) → citrato (azul) → heparina (verde) → EDTA (lila) → fluoruro (gris). Memorizar el orden evita la contaminación cruzada de aditivos.
El volumen mínimo de llenado es un dato que se pregunta: los tubos de citrato deben llenarse al menos al 90 % de su capacidad nominal; un llenado insuficiente altera la relación anticoagulante/sangre y falsea los resultados de coagulación.
Hemocultivos (Recomendaciones SEIMC)
Los hemocultivos detectan bacteriemia o fungemia. Puntos clave:
- Se extraen antes de iniciar antibioterapia siempre que sea posible.
- Se recomienda extraer 2-3 sets por episodio febril, de venopunciones distintas.
- Cada set consta de un frasco aerobio y un frasco anaerobio.
- Volumen de sangre por frasco: 8-10 mL en adulto (dato muy preguntado).
- La piel debe desinfectarse con clorhexidina alcohólica al 2 % o povidona yodada, dejando actuar el tiempo de contacto indicado.
- Los frascos se incuban a 35-37 °C y no deben refrigerarse.
- Tiempo máximo desde extracción hasta introducción en el sistema de incubación: 2 horas.
Gasometría arterial (Recomendaciones SEQCML)
La gasometría mide pH, pO₂, pCO₂ y bicarbonato. Aspectos preanalíticos críticos:
- La muestra es sangre arterial (arteria radial habitualmente).
- La jeringa debe ser heparinizada (heparina de litio en jeringa específica de gasometría).
- Tras la extracción, se elimina el aire de la jeringa de inmediato para evitar alteración de los gases.
- La muestra se analiza en un máximo de 30 minutos si se conserva a temperatura ambiente, o hasta 60 minutos si se conserva en hielo (entre 0 y 4 °C).
- La presencia de burbujas de aire eleva falsamente la pO₂ y disminuye la pCO₂.
- El exceso de heparina líquida diluye la muestra y altera el pH.
Muestras respiratorias (Protocolo SEIMC / CNM-ISCIII)
- Esputo: primera muestra de la mañana, tras enjuague bucal con agua (sin antiséptico). Se recoge en recipiente estéril de boca ancha.
- Frotis nasofaríngeo: técnica de elección para virus respiratorios (incluido SARS-CoV-2). Se introduce el hisopo por la fosa nasal hasta la nasofaringe, se rota y se retira. Se introduce en medio de transporte viral (MTV).
- Lavado broncoalveolar (BAL): recogida por personal especializado; el TCAE colabora en la preparación del material.
- Conservación de muestras respiratorias: entre 2 y 8 °C si el procesamiento se demora más de 2 horas; nunca congelar el frotis nasofaríngeo en MTV salvo indicación expresa.
Sangre oculta en heces – Cribado de cáncer colorrectal (SNS)
El Programa de cribado de cáncer colorrectal del SNS utiliza la prueba de sangre oculta en heces inmunológica (SOHi). Instrucciones al paciente:
- No requiere restricción dietética previa (a diferencia de la prueba de guayaco).
- Se recoge una muestra de heces en el dispositivo específico del kit.
- Se conserva en nevera (entre 2 y 8 °C) hasta su entrega al laboratorio.
- El plazo máximo de conservación antes del análisis varía según el fabricante del kit, pero habitualmente no supera los 7 días en refrigeración.
Transporte de muestras biológicas (Real Decreto 65/2006)
El Real Decreto 65/2006, de 30 de enero, transpone la normativa ADR sobre transporte de mercancías peligrosas. Las muestras biológicas se clasifican en la Clase 6.2: sustancias infecciosas.
Dentro de la Clase 6.2 se distinguen:
- Categoría A (UN 2814 / UN 2900): sustancias que pueden causar incapacidad permanente o enfermedad mortal. Requieren embalaje P650.
- Categoría B (UN 3373): sustancias que no cumplen los criterios de categoría A. Embalaje “triple envase” (recipiente primario estanco + absorbente + recipiente secundario estanco + caja exterior rígida).
El sistema de triple envase es el estándar para la mayoría de muestras clínicas hospitalarias (categoría B):
- Recipiente primario (tubo o frasco con la muestra, hermético)
- Recipiente secundario (bolsa o contenedor estanco con material absorbente)
- Embalaje exterior rígido con etiqueta UN 3373
Cadena de custodia (Ley de Enjuiciamiento Criminal)
Cuando una muestra biológica tiene valor probatorio en un procedimiento judicial (agresiones sexuales, intoxicaciones, etc.), debe mantenerse la cadena de custodia. Esto implica:
- Documentar quién recoge la muestra, cuándo y en qué condiciones.
- Garantizar que la muestra no ha sido alterada ni sustituida en ningún momento.
- Registro de cada cambio de custodia con firma del responsable.
- Almacenamiento en condiciones controladas y con acceso restringido.
El incumplimiento de la cadena de custodia puede invalidar la prueba en sede judicial.
Datos numéricos y plazos que más se preguntan
- Volumen de sangre por frasco de hemocultivo en adulto: 8-10 mL
- Número de sets de hemocultivos recomendados: 2-3
- Llenado mínimo del tubo de citrato: 90 % de la capacidad nominal
- Tiempo máximo para procesar gasometría a temperatura ambiente: 30 minutos
- Tiempo máximo para procesar gasometría en hielo (0-4 °C): 60 minutos
- Temperatura de conservación de muestras respiratorias: 2-8 °C
- Clasificación de muestras clínicas en transporte: Clase 6.2, Categoría B, UN 3373
- Temperatura de incubación de hemocultivos: 35-37 °C
Errores típicos del opositor
- Confundir el tapón azul (citrato, coagulación) con el tapón negro (citrato VSG): ambos llevan citrato pero a concentraciones distintas y para pruebas distintas.
- Creer que los hemocultivos se refrigeran: nunca; se incuban a 35-37 °C.
- Olvidar que el tubo de citrato debe llenarse al 90 %: el llenado insuficiente es causa frecuente de rechazo de muestra.
- Confundir Categoría A y Categoría B del RD 65/2006: las muestras clínicas habituales son Categoría B (UN 3373).
- Pensar que la prueba de sangre oculta inmunológica requiere restricción dietética: no la requiere (sí la requiere la prueba de guayaco, que ya no se usa en el cribado del SNS).
Trucos mnemotécnicos
- Orden de tubos: “Rojo Azul Verde Lila Gris” → R-A-V-L-G → “Rápido A Ver La Glucosa”
- Triple envase: “PAE” → Primario, Absorbente, Exterior
- Gasometría: “30 en mesa, 60 en hielo” (minutos máximos de conservación)
- Hemocultivos: “2-3 sets, 8-10 mL, 35-37 °C, nunca nevera”
- UN 3373: el número 3 aparece dos veces → muestras clínicas ordinarias (no las más peligrosas)